SARS-COV-2 RT-qPCR Assay (วิธี Triple Fluorescence RT-PCR) การตรวจหายีน ORF1ab และ N ของ SARS CoV 2
หลักการ | สามฟลูออเรสเซนต์ RT-PCR |
รูปแบบ | หลอด |
ตัวอย่าง | Nasopharyngeal Swab / Oropharyngeal Swab / เสมหะ |
ใบรับรอง | CE |
เวลาอ่านหนังสือ | 1 ชั่วโมง |
หีบห่อ | 50T / 100T |
อุณหภูมิในการจัดเก็บ | 30~15°C |
อายุการเก็บรักษา | 6 เดือน |
ความไว | 100% |
ความจำเพาะ | 99.10% |
ความแม่นยำ | 99.30% |
ตัดยอด | 200 สำเนา/มล. |
การทดสอบ SARS-COV-2 RT qPCR เป็นการทดสอบปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสแบบย้อนกลับ (RT) แบบเรียลไทม์ (rt) ที่มีไว้สำหรับการตรวจจับเชิงคุณภาพของยีน ORF1ab และ N ของ SARS CoV 2 ในช่องจมูก (NP) ไม้กวาด oropharyngeal (OP) และตัวอย่างเสมหะที่เก็บโดยบุคลากรทางการแพทย์ จากผู้ป่วยที่สงสัยว่าติดเชื้อ โควิด-19 โดยผู้ให้บริการด้านสุขภาพของพวกเขา
ใช้งานสะดวก
การตรวจจับสามเท่าในหลอดเดียว (ยีน ORF1ab & N, ยีน RNAse P (RNP) ของมนุษย์) ไพรเมอร์และโพรบแบบของเหลวผสมล่วงหน้า
เชื่อถือได้
เร็ว
ผลลัพธ์ในประมาณ 1 ชั่วโมง
เครื่องมือที่ใช้บังคับ:
เครื่องมือ PCR แบบเรียลไทม์พร้อมช่อง FAM, TEXAS RED/ROX และ HEX/VIC เช่น ABI7500, ABI Q3, ABI Q6, Bio Rad CFX96
โรคปอดบวมจากเชื้อไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ (coronavirusdisease2019, โควิด-19)การติดเชื้อ sars-cov-2 เป็นปัญหาสาธารณสุขระดับโลกที่ร้ายแรง ซึ่งก่อให้เกิดความสูญเสียทางเศรษฐกิจอย่างรุนแรงทั่วโลก ส่งผลให้องค์การอนามัยโลก (WHO) กำหนดลักษณะของการระบาดของ sars-cov-2 ว่าเป็นเหตุฉุกเฉินด้านสาธารณสุขที่น่ากังวลระหว่างประเทศ
การตรวจคัดกรองผู้ป่วยต้องสงสัยตั้งแต่เนิ่นๆ การแยกและรักษาผู้ป่วยที่ติดเชื้อ sars-cov-2 เป็นกุญแจสำคัญในการควบคุมการระบาด เนื่องจากไม่มียาหรือวัคซีนเฉพาะสำหรับรักษาโรคปอดบวม neocrownปัจจุบัน มาตรฐานทองคำสำหรับการวินิจฉัยการติดเชื้อ sars-cov-2 คือปฏิกิริยาลูกโซ่ reversetranscription-polymerase (rt-pcr)นับตั้งแต่มีการปล่อยจีโนมที่สมบูรณ์ของ sars-cov-2 ห้องปฏิบัติการสาธารณสุข ห้องปฏิบัติการทางคลินิก และบริษัทวินิจฉัยโรคจากประเทศต่างๆ ได้พัฒนาวิธีการ rt-pcr ที่หลากหลายสำหรับการตรวจหา sars-cov-2 โดยกำหนดเป้าหมายไปที่ยีนและภูมิภาคจีโนมที่แตกต่างกัน จีโนมของไวรัส (orf1ab, rdrp, n, e, ฯลฯ )
อย่างไรก็ตาม วิธีการ rt-pcr ได้เผยให้เห็นข้อเสียและข้อบกพร่องหลายประการในทางปฏิบัติ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในช่วงภาวะฉุกเฉินด้านสาธารณสุข เช่น การระบาดของ sars-cov-2 ในปัจจุบันวิธี rt-pcr นั้นยุ่งยากในการดำเนินการและจำเป็นต้องดำเนินการกับเครื่องมือ pcr โดยช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการมืออาชีพที่ได้รับการฝึกอบรม
ทำให้ยากต่อการตอบสนองความต้องการสำหรับการทดสอบในสถานที่ และสำหรับพื้นที่ห่างไกลหรือโรงพยาบาลปฐมภูมิที่มีทรัพยากรจำกัด ตัวอย่างจะต้องถูกส่งไปยังโรงพยาบาลระดับสูงที่มีอุปกรณ์ทดสอบ rt-pcr สำหรับการทดสอบนี่ไม่เพียงแต่ใช้เวลานาน แต่ยังเพิ่มความเสี่ยงของการสัมผัสกับไวรัสนอกจากนี้ rt-pcr สำหรับการทดสอบ sars-cov-2 ระหว่างการระบาดใหญ่ของ โควิด-19 ได้ให้อัตราการลบเท็จสูง (30-50%) ด้วยเหตุผลหลายประการ ซึ่งยังคงเป็นปัญหาที่ไม่สำคัญ
ปฏิกิริยาการรวมตัวของ DNA ในตัวเร่งปฏิกิริยาด้วยตัวเร่งปฏิกิริยา (catalytichairpinassembly, cha) เป็นระบบขยายสัญญาณกรดนิวคลีอิกที่ปราศจากเอนไซม์ด้วยความร้อนโพรบดีเอ็นเอสายเดี่ยวเสริมสองชุดที่มีโครงสร้างแบบกิ๊บได้รับการออกแบบตามชิ้นส่วนอาร์เอ็นเอเป้าหมายที่ตรวจพบเมื่อไม่มีชิ้นส่วนเป้าหมาย ดีเอ็นเอสายเดี่ยวทั้งสองชุดจะมีอยู่ในโครงสร้างแบบกิ๊บ
เมื่อชิ้นส่วน RNA เป้าหมายมีอยู่ในระบบ โพรบดีเอ็นเอสายเดี่ยวสองชุดที่มีโครงสร้างกิ๊บจะเปิดโครงสร้างกิ๊บตามลำดับ และก่อตัวเป็นเกลียวคู่ของดีเอ็นเอภายใต้ผลของการเร่งปฏิกิริยาของอาร์เอ็นเอเป้าหมายกระบวนการเร่งปฏิกิริยาทั้งหมดไม่ได้ใช้แฟรกเมนต์ RNA เป้าหมาย และชิ้นส่วน RNA เป้าหมายกระตุ้นโพรบดีเอ็นเอสายเดี่ยวสองชุดให้ก่อตัวเป็นเกลียวคู่ก่อนที่จะดำเนินการต่อไปในปฏิกิริยารอบถัดไป ซึ่งจะเป็นการสร้างการขยายสัญญาณสุดท้าย การตรวจจับชิ้นส่วน RNA เป้าหมายทำได้โดยการตรวจจับโพรบ DNA แบบเกลียวคู่